Tugas Kimia Analitik II: Kromatografi Kolom

Pertanyaan:

Kenapa tidak boleh ada patahan silika gel pada kromatografi kolom?

Jawaban:

Pada kromatografi kolom digunakan adsorben silika gel karena kolom yang dibentuk dengan silika gel memiliki tekstur dan struktur yang lebih kompak dan teratur. Silika gel memadat dalam bentuk tetrahedral raksasa, sehingga ikatannya kuat dan rapat. Dengan demikian, adsorben silika gel mampu menghasilkan proses pemisahan yang lebih optimal.

            Pengisian silika gel harus hati-hati karena pengisian yang tidak teratur akan menyebabkan adanya gelembung udara yang memungkinkan terjadinya difusi eddy dan mass transfer non-equilibrum dan selanjutnya mengakibatkan pelebaran pita kromatografi.  Difusi eddy terjadi akibat dari panjang jalur gerakan molekul-molekul komponen tidak sama sepanjang kolom. Molekul-molekul yang masuk bersama-sama pada ujung kolom, keluar pada waktu yang tidak bersamaan pada ujung yang lain. Variasi panjang jalur ini salah satunya akibat dari ketidakseragaman kemasan kolom yang berkaitan dengan adanya gelembung-gelembung udara di dalam kolom. Gelembung udara ini menyebabkan adanya ruangan kosong (dead space) yang tidak aktif menjerap linarut, sehingga linarut mengalir tidak beraturan dan terjadi ketidakseragaman kecepatan turun linarut dan fase gerak. Mass transfer non-equilibrum juga dapat terjadi karena belum terjadi kesetimbangan yang penuh pada plat teori namun linarut telah turun terlebih dahulu, hal ini dapat disebabkan karena adanya gelembung-gelembung udara pada plat teori.

            Jadi, gelembung udara atau patahan silika gel pada kromatografi kolom menyebabkan distribusi tidak merata (ketidakhomogenan penyerap), sehingga pemisahan menjadi kurang baik (tidak sempurna).